3d旋轉(zhuǎn)細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)-微重力效應(yīng)模擬-重慶市細(xì)胞培養(yǎng)
當(dāng)我通過(guò)平板培養(yǎng)得到好的結(jié)果時(shí)為什么我要換成3d細(xì)胞培養(yǎng)?
二維細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)我們對(duì)細(xì)胞生物學(xué)的理解做出了很大的貢獻(xiàn),但是能從中獲取的信息量還是有限制性的??茖W(xué)家雖然對(duì)過(guò)去100年的傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)很滿意,但是這不再具有必要性。組織培養(yǎng),根據(jù)定義,盡量模擬體內(nèi)環(huán)境,并且很顯然,活著的生物日是三維的,懸浮細(xì)胞培養(yǎng)需要旋轉(zhuǎn)嗎,而不是二維的。因此,為了建立模擬體內(nèi)生物學(xué)模型,體外培養(yǎng)系統(tǒng)一定變成三維的。
rccs三維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的應(yīng)用?
1取材 在無(wú)菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種組織細(xì)胞(視實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ǎ?,?jīng)過(guò)一定的處理(如消化分散細(xì)胞、分離等)后接入培養(yǎng)器血中,這一過(guò)程稱為取材。如是細(xì)胞株的擴(kuò)大培養(yǎng)則無(wú)取材這一過(guò)程。機(jī)體取出的組織細(xì)胞的首1次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。2培養(yǎng) 將取得的組織細(xì)胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過(guò)程稱為培養(yǎng)。3凍存及復(fù)蘇(可參閱后面有關(guān)章節(jié))為了保存細(xì)胞,3d旋轉(zhuǎn)細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng),特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般用液氮的溫度-196℃,旋轉(zhuǎn)式細(xì)胞培養(yǎng),將細(xì)胞收集至凍存管中加入含保護(hù)劑(一般為二甲亞砜或甘油)的培養(yǎng)基,重慶市細(xì)胞培養(yǎng),以一定的冷卻速度凍存,終保存于液氮中。在*低的溫度下,細(xì)胞保存的時(shí)間幾乎是的。復(fù)蘇一般采用快融方法,即從液氮中取出凍存管后,立即放入37℃水中,使之在一分鐘內(nèi)迅速融解。然后將細(xì)胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)器皿中進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞增殖檢測(cè)技術(shù)
目前主要有兩種用于檢測(cè)細(xì)胞增殖能力的方法。一種是直接的方法,通過(guò)直接測(cè)定進(jìn)行分裂
的細(xì)胞數(shù)來(lái)評(píng)價(jià)細(xì)胞的增殖能力。另一種是間接的方法,即細(xì)胞活力(cell viability)檢測(cè)方法,通過(guò)檢測(cè)樣品中健康細(xì)胞的數(shù)目來(lái)評(píng)價(jià)細(xì)胞的增殖能力。顯然,細(xì)胞活力檢測(cè)法并不能終證明檢測(cè)樣品中的細(xì)胞是否在增殖。如細(xì)胞在某一培養(yǎng)條件下會(huì)自發(fā)啟動(dòng)凋亡程序,但的干擾可*凋亡的發(fā)生;這時(shí)若采用細(xì)胞活力檢測(cè)法,顯然可以區(qū)分兩種條件下的細(xì)胞數(shù)量,但我們并不能從干擾組細(xì)胞數(shù)大于對(duì)照組的事實(shí)說(shuō)明可促進(jìn)細(xì)胞增殖的結(jié)論。所以直接的證據(jù)應(yīng)該采用方法一。
其中常見(jiàn)檢測(cè):cck8檢測(cè)法 ,mtt檢測(cè)法,brdu檢測(cè)法,edu檢測(cè)法,平板克x隆形成。
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